如何改進(jìn)ELISA試劑盒在實驗中的錯誤呢?

更新時間：2021-07-07

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　　ELISA試劑盒有許多實驗操作步驟,新手操作難免出錯.其中許多錯誤是由不充分的細(xì)節(jié)造成的.有很多方法可以減少這種錯誤,比如在做實驗時少說話,以防止唾液掉進(jìn)酶的標(biāo)簽中.當(dāng)然,我們也要學(xué)會探索自己的問題,找出原因.那么,我們?nèi)绾胃倪M(jìn)ELISA試劑盒實驗中的錯誤呢?

　　1 評價試劑的實用性試劑的穩(wěn)定性對準(zhǔn)確度非常重要.在啟用試劑盒之前,應(yīng)重復(fù)檢測陰性和陽性對照品和樣品,試劑僅在試劑符合要求后才能使用.

　　2 操作前仔細(xì)閱讀試劑盒說明書嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作.不同批號的試劑不混合.值得改進(jìn)的是,只有經(jīng)過反復(fù)的試驗,如洗盤的數(shù)量,才能加以改進(jìn).

　　3 加樣要準(zhǔn)確快速樣品添加的不準(zhǔn)確度和酶制劑用量的不確定度直接影響顯色效果.此外,顯色深度和A值的確定與顯色劑和終液體的加入量有關(guān),因此樣品的裝載應(yīng)謹(jǐn)慎.需要在一定時間內(nèi)完成采樣的實驗,如果采樣速度慢,會出現(xiàn)誤差,試劑會暴露很長時間,特別是當(dāng)室溫過高時,保質(zhì)期會縮短甚至失效.

　　4 檢驗技術(shù)人員應(yīng)具備實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗.檢測技術(shù)人員能夠熟練操作實驗儀器儀表,具有一定的總結(jié)和分析問題的能力,能及時妥善地解決試劑盒實驗中出現(xiàn)的意外情況.

　　5 洗滌要*洗版不*,酶偶聯(lián)物的背景顏色為假陽性.此外,清潔劑應(yīng)該是新鮮的,可以隨時使用.舊的洗滌劑會增加背景,也可能出現(xiàn)假陽性.

　　6 嚴(yán)控試劑盒實驗反應(yīng)時間試劑盒反應(yīng)時間過長,酶被滅活,反應(yīng)時間過短,酶與血清中的微生物抗原和抗體不能*結(jié)合,產(chǎn)物結(jié)構(gòu)松散不穩(wěn)定,易清洗,易產(chǎn)生假陰性.

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